Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)的必要性,通過預(yù)實(shí)驗(yàn)可以熟悉整個(gè)實(shí)驗(yàn)的流程,發(fā)現(xiàn)可能忽略的問題;可以測試樣本和試劑盒是否匹配,一旦出現(xiàn)不匹配的情況,不至于浪費(fèi)過多樣本;可以對樣品中目的分析物的濃度作一下大致參考,以確定合適稀釋度。
一、Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒使用注意事項(xiàng):
室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫(20- 25℃)會(huì)導(dǎo)致數(shù)值偏低。
在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥過久的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板排干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對光敏感,避免直接暴露在光線下。
混合要均勻,洗板要*(包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時(shí)候都必需充分混合均勻)。
終止液為強(qiáng)酸性物質(zhì),避免接觸皮膚。
不要使用過了有效期的試劑盒,也不要混合使用不同批次的試劑盒,這樣會(huì)引起測定結(jié)果不準(zhǔn)確。
試劑盒的儲(chǔ)存條件是2-8℃,切勿冷凍。
二、剩余試劑的妥善保存:
酶聯(lián)免疫試劑盒恢復(fù)至室溫后,取出要使用的酶標(biāo)板孔,未使用的酶標(biāo)板孔應(yīng)及時(shí)放回鋁箔袋,加入干燥劑,封緊封口,冷藏保存。
試劑盒常用檢測方法簡介
ELISA試劑盒一般適合樣品檢測量大,實(shí)驗(yàn)室中常用于初篩的檢測方法。若檢測到陽性樣本,再用確認(rèn)方法做準(zhǔn)確定量。
試劑盒檢測方法及優(yōu)點(diǎn)介紹:
A、間接法:此測定方法與直接法類似,差別在于一級(jí)抗體沒有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測定抗原量。
優(yōu)勢:二抗可以加強(qiáng)信號(hào),而且有多種選擇能做不同的測定分析,不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它最多的免疫反應(yīng)性。
B、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體,即可測定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
C、雙抗體夾心法:被檢測的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體,另一個(gè)則是檢測抗體,此抗體可用酶標(biāo)記后直接測定抗原的量,或不標(biāo)記,再透過酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來測定抗原的量,這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應(yīng)或競爭相同的抗原結(jié)合部位。
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